产品货号:
SY0403
中文名称:
内毒素高效去除树脂
英文名称:
Endotoxin Removal Agarose Resin, High Performance
产品规格:
10ml|100ml|500ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是一种用于去除生物源蛋白类产品(包括多肽、抗体、多糖等)中内毒素的树脂。其原理是将修饰过的多粘菌素B连接至4%琼脂糖微球上,进行特异性去除内毒素,经纯化可将样品中内毒素降低至0.1EU/ml,且样品回收率高。
基质 | 4%琼脂糖微球 |
配体 | 修饰过的多粘菌素B |
粒径 | 45~165μm |
载量 | >2000000EU/ml基质 |
最大压力 | 0.1 MPa,1bar |
pH稳定范围 | 5-10 |
储存缓冲液 | 20%乙醇 |
组分 | 10mL | 100mL | 500mL |
内毒素高效去除树脂 | 10mL | 100mL | 500mL |
说明书 | 1份 |
保存:2~8℃,有效期2年。
- 本品可耐受试剂:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1M尿素,300mM咪唑;0.05% Tween 20,10mM DTT等。
- 样品在上样前最好用0.22μm或0.45μm滤膜过滤,减少杂质以防阻塞柱子;
- 内毒素结合柱子的最佳pH为6~9,因此样品pH最好控制在7-8;
- 样品最好控制在适当的离子强度,减少非特异吸附,约150mM~500mM。
- 所用水和Buffer以及耗材均需无热原处理,防止在使用过程中引入内毒素。
- 平衡液:20mM磷酸盐缓冲液,150mM NaCl,pH7.4。
- 再生液:1% Triton X-114。
注:结合液和洗脱液可根据样品性质进行改变,建议pH7~8,NaCl约150mM~500mM。
- 装柱:充分混匀Endotoxin Removal Agarose Resin,用无热原枪头吸取适量浆液加入合适的层析柱中,注意避免产生气泡,打开下出口去掉保护液,用3mL再生液进行清洗,控制流速在0.25mL/min,或<10滴/min。重复至少2次,确保柱中无内毒素。
- 平衡:用3mL的平衡液平衡柱管内壁及树脂,流干,流速约0.5mL/min,重复至少两次。
- 过柱及检测:将样品加到平衡好的树脂中,调节流速在0.25mL/min,或<10滴/min,当流出液流出约1mL时,开始收集流出液,流干后加入1mL平衡液继续收集。检测样品中内毒素含量及样品回收率
注:如果样品中内毒素含量仍高于目标值,继续重复1-3。
问题 | 可能的原因 | 建议 |
内毒素去除效率低 | 样品pH值不在内毒素结合范围内 | 用0.1M NaOH或0.1M HCl调节至pH7~8 |
样品与树脂接触时间短 | 减少流速,增加样品接触时间 | |
去除或检测系统被内毒素污染 | 所有试验用品均需无热源产品 | |
内毒素与目的蛋白结合较强 | 优化样品pH,使样品与内毒素分离 | |
样品被污染 | 树脂纯化过其他样品 | 不用使用过的树脂去除不同样品内毒素 |
样品回收率低 | 样品非特异性吸附在树脂上 | 增加样品和平衡液的NaCl浓度 |
目的蛋白与内毒素结合一起 | 优化样品pH,使样品与内毒素分离 |
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